Hydro sunfua thường thu được nhất khi tách khỏi khí chua, đây là khí tự nhiên có hàm lượng H
2S cao. Nó cũng có thể được sản xuất bằng cách xử lý hydro bằng lưu huỳnh nguyên tố nóng chảy ở khoảng 450 °C. Các hydrocarbon có thể phục vụ như một nguồn cung cấp hydro trong quá trình này.[9]

Vi khuẩn khử sunfat (giảm lưu huỳnh) tạo ra năng lượng có thể sử dụng trong điều kiện oxy thấp bằng cách sử dụng sunfat (lưu huỳnh nguyên tố) để oxy hóa các hợp chất hữu cơ hoặc hydro; điều này tạo ra hydro sunfua như một sản phẩm thải.

Một chế phẩm phòng thí nghiệm tiêu chuẩn là xử lý sắt sunfua bằng axit mạnh trong bình Kipp:

FeS + 2 HCl → FeCl2 + H2S

Để sử dụng trong phân tích vô cơ định tính, thioacetamide được sử dụng để điều chế H
2S:

CH3C(S)NH2 + H2O → CH3C(O)NH2 + H2S

Nhiều sunfua kim loại và phi kim, ví dụ nhôm sunfua, photpho pentasulfide, silic disulfide giải phóng hydro sunfua khi tiếp xúc với nước:[10]

6 H2O + Al2S3 → 3 H2S + 2 Al(OH)3

Khí này cũng được sản xuất bằng cách đun nóng lưu huỳnh với các hợp chất hữu cơ rắn và bằng cách giảm các hợp chất hữu cơ chứa lưu huỳnh bằng hydro.

Máy nước nóng có thể hỗ trợ chuyển đổi sulfate trong nước thành khí hydro sulfide. Điều này là do cung cấp một môi trường ấm áp bền vững cho vi khuẩn lưu huỳnh và duy trì phản ứng tương tác giữa sunfat trong nước và cực dương của máy nước nóng, thường được làm từ kim loại magiê.[11]

Sinh tổng hợp trong cơ thể

Hydro sunfua có thể được tạo ra trong các tế bào thông qua con đường enzyme hoặc không enzyme. H
2S trong cơ thể hoạt động như một phân tử tín hiệu khí được biết là có tác dụng ức chế Phức hợp IV của chuỗi vận chuyển điện tử ti thể làm giảm hiệu quả hoạt động tạo ATP và sinh hóa trong tế bào.[12] Ba enzyme được biết đến có tổng hợp H
2S: cystathionine-lyase (CSE), cystathionine-synthetase (CBS) và 3-mercaptopyruvate sulfurtransferase (3-MST).[13] Những enzyme này đã được xác định trong một chiều rộng của các tế bào và mô sinh học, và hoạt động của chúng đã được quan sát thấy là do một số trạng thái bệnh gây ra.[14] Ngày càng rõ ràng rằng H
2S là một trung gian quan trọng của một loạt các chức năng tế bào trong sức khỏe và bệnh tật.[13] CBS và CSE là những người đề xuất chính của H
2S, theo con đường trans-sulfuration.[15] Những enzyme này được đặc trưng bởi sự chuyển một nguyên tử lưu huỳnh từ methionine sang serine để tạo thành một phân tử cystein.[15] 3-MST cũng góp phần vào việc sản xuất hydro sunfua bằng con đường dị hóa cystein.[14][15] Các axit amin trong chế độ ăn uống, chẳng hạn như methionine và cysteine đóng vai trò là chất nền chính cho quá trình chuyển hóa và trong sản xuất hydro sunfua. Hydrogen sulfide cũng có thể được tổng hợp bằng con đường không enzyme, có nguồn gốc từ các protein như ferredoxin và protein Rieske.[14]